辣椒制品中苏丹红的测定 胶体金免疫层析法 高提取率 高纯化性能

苏丹红是塑料和其他合成材料着色常用的一种合成染色剂。由于色彩鲜艳，这种染色剂曾被不法商人用来增强多种食品的颜色，例如香料、香料混合物和酱料等。苏丹红和偶氮染色剂均被国际癌症研究机构(IARC)划分为潜在遗传毒性物质和/或致癌物质。

测定苏丹红时，实验室通常会选择中性氧化铝柱或分子印迹柱净化样品。然而在处理复杂基质时，往往存在回收率低、操作流程复杂、净化效果差等问题。针对此类情况特推出了胶体金免疫层析快速检测方法。本方法适用辣椒酱、辣椒油、辣椒粉中苏丹红I的快速测定。

以辣椒粉为基质，进行了0.2 mg/kg、0.5 mg/kg、1.0 mg/kg低中高三个浓度水平的加标实验。实验结果显示，用CLB苏丹红专用净化柱处理辣椒粉样品后，苏丹红的回收率在83% ~ 101%之间，RSD 在5 %以内，该方法稳定可靠、灵敏度高，能够作为苏丹红样品测定，特别是复杂样品测定的一个优选方案。

试剂和材料：

除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。

• 试剂
• 乙腈
• 无水硫酸镁
• 正己烷
• 二氯甲烷
• 氢氧化钠
• 氢氧化钠溶液（2mol/L）：称取氢氧化钠（3.1.5）8g，用水溶解并稀释至100mL
• 无水乙醇
• 复溶液：将无水乙醇（3.1.7）与水按照体积比25:75混匀

标准溶液的配制：

苏丹红I标准储备液（1mg/mL）：精密称取苏丹红I参考物质（3.2）适量，置于10mL容量瓶中，加入适量乙腈（3.1.1）超声溶解后，用乙腈稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1mg/mL的苏丹红Ⅰ标准储备液。-20 ℃避光保存，有效期6个月。

苏丹红I标准中间液（1μg/mL）：精密量取苏丹红I标准储备液（1mg/mL）（3.3.1）100μL，置于100mL容量瓶中，用乙腈（3.1.1）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1μg/mL的苏丹红I标准中间液。

材料：

1. CNW Poly-sery MIP-SDR固相萃取柱（200mg/3mL），或相当者；
2. 苏丹红I胶体金免疫层析试剂盒，适用基质为辣椒酱、辣椒油、辣椒粉；
3. 金标微孔。

仪器设备配置：

1. 移液器：200μL、1mL和5mL
2. 涡旋混合器
3. 离心机：转速≥4000r/min
4. 电子天平：感量为0.01g
5. 氮吹仪
6. 水浴锅
7. 环境条件：温度15℃～35℃，湿度≤80%。

分析步骤：

试样制备：

取适量样品，液体样品或半固体样品充分混匀，固体样品充分粉碎混匀。

试样的提取：

辣椒酱
称取辣椒酱2g（精确至0.01g）于15mL离心管中，加入0.5g无水硫酸镁（3.1.2）和5mL正己烷（3.1.3）提取液，涡旋振荡1min后，4000r/min离心5min。将上清液全部加入到固相萃取柱（3.4.1）中，流出液弃去。再加入6mL正己烷淋洗固相萃取柱，流出液弃去。用2mL二氯甲烷（3.1.4）洗脱固相萃取柱，收集洗脱液吹干。精密加入400μL复溶液（3.1.8），涡旋混合1min，作为待测液，立即测定。

辣椒油
称取辣椒油5g（精确至0.01g）于15mL离心管中，加入8mL正己烷（3.1.3）进行提取，涡旋振荡1min后，将上清液全部加入到固相萃取柱中，流出液弃去。再加入6mL正己烷淋洗固相萃取柱，流出液弃去。用2mL二氯甲烷（3.1.4）洗脱固相萃取柱，收集洗脱液吹干。精密加入400μL复溶液（3.1.8），涡旋混合1min，作为待测液，立即测定。

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