LS55荧光分光光度计检测细胞内钙离子 实时变化

细胞内钙浆液是调节细胞活动的重要第二信使，其浓度的变化会影响细胞的生长、分化、程序细胞死亡等多种生理活动。使用钙调节性荧光指示剂如Fura-2或Fura-FF，细胞内钙浓度的变化会导致指示剂荧光强度的变化。利用LS55荧光分光光度计检测，可算得细胞内钙浓度。

主要原理：

在细胞内加入荧光钙指示剂，例如苯基相关化合物如Fura-2。 这种荧光剂在焦点平面上被激发后会发出荧光，且其荧光强度与细胞内钙离子浓度成反比。

当细胞内钙浓度升高时，荧光剂与钙形成配合物，荧光强度降低。 通过LS55测量不同激光波长下(340nm和380nm)的荧光强度(通常是510nm)， 可以计算出细胞内钙浓度。

具体步骤：

将细胞贴片加入含有荧光钙指示剂的溶液中孵育，使荧光剂进入细胞内。

将贴片装载到LS55光学系统内，分别以340nm 和 380nm激光波长激发。

记录不同波长下荧光强度，根据校正曲线计算出细胞内钙浓度。

利用药物或细胞刺激，触发细胞内钙的释放，实时记录钙浓度的变化。

数据计算软件也可同时分析细胞内不同区域钙浓度的差异。

优点：

灵敏度高，能检测细胞内钙的微量变化。

实时性好，能实时监测细胞内钙浓度的动态变化。

空间分辨率高，能区分不同细胞内部的钙浓度差异。

系统成熟，操作简单。

LS55荧光分光光度计可以用于检测细胞内钙的变化。是最常见的检测方法，灵敏度高，高通量，能实时观察细胞内钙的动态变化。

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