keyan.scivip.com创建 时间2011-05-31 17:42

实蝇的分子鉴定研究 需要哪些实验仪器及试剂?农业害虫防治

随着分子生物学技术和生化技术的不断发展和完善,许多新的技术被应用在昆虫分类上,如RAPD、RFLP、DNA杂交。在国内,少数学者利用生化方法对实蝇进行鉴定,利用分子生物学方法对实蝇进行鉴定的几乎没有。本文利用RAPD和PCR技术对陕西常见4种实蝇进行研究,主要阐述实验中所需要的实验仪器设备以及试剂耗材等。

南瓜实蝇、具条实蝇、桔大实蝇、三点棍腹实蝇成虫均采用Cuelure诱剂和蛋白质诱剂采自陕西省岚皋县柑桔园,把标本采集回来以后,利用形态特征进行分类后,其中一部分针插后常规保存,一部分放入-70℃超低温冰箱中保存。

实蝇的分子鉴定研究 需要哪些实验仪器及试剂?农业害虫防治 第1张

实验仪器设备

  • PCT-200TM型(双槽)基因扩增仪
  • UVIDBT-08型凝胶成像系统
  • DYY12型三恒电泳仪
  • MIKR.22R型台式高速冷冻离心机
  • DYY-1131A型水平电泳槽
  • VDUPF-20超纯水仪
  • 核酸/蛋白质检测分析仪
  • P2-P10-P20-P100-P200-P1000微量移液器
  • MDF-382E超低温冰箱
  • BP211D电子天平
  • sw-cj-lf(单人双面)超净工作台
  • TGL-1613台式高速离心机
  • 85-1恒温磁力搅拌器
  • HH-4数显恒温水浴锅
  • PHS-2S精密酸度计
  • KQ-C玻璃仪器烘干器

实验耗材试剂

1.5m1离心管、0.5m1和0.2m1PCR管、枪头、PE手套。

CTAB,DNA分子量标准;Na2EDTA,p一琉基乙醇、Tris、琼脂糖、随机引物;TagDNA聚合酶;异丙醇、氯仿、异戊醇;特异引物等。

在研究中,笔者发现在实验室超低温冰箱中保存的标本,无论是用CTAB法,还是Collins法,都能进行很好的提取,特别是在冰箱中保存达一年左右后,仍能较好地进行DNA的提取。由此可见,是否能提出干标本中的DNA,与提取方法、研磨程度、沉淀时间等没有直接的关系,而与标本的保存条件有很大关系。

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最近更新时间2022-04-22 14:42
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