红花的功效与药理作用测定 HPLC高效液相色谱法测定

红花,中药名。为菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥花。夏季花由黄变红时采摘,阴干或晒干。全国各地广有栽培。具有活血通经,散瘀止痛之功效。用于经闭,痛经,恶露不行,症瘕痞块,胸痹心痛,瘀滞腹痛,胸胁刺痛,跌扑损伤,疮疡肿痛。

含量测定:

1、羟基红花黄色素A

对照品溶液制备:精密称取羟基红花黄色素A对照品适量,加25%甲醇制成每1mL含0.13mg的溶液,即得。

供试品溶液制备:取本品粉末(过三号筛)约0.4g,精密称定。置具塞锥形瓶中,精密加入25%甲醇50mL,称定重量,超声提取(功率300W,频率50kHz)40min,放冷,再称定重量,用25%甲醇补足减失的重量,摇匀,用0.45um滤膜过滤,即得。

红花的功效与药理作用测定  HPLC高效液相色谱法测定 第1张

色谱条件:

  • 检测器:紫外检测器,检测波长:403nm
  • 色谱柱:亲水性C18柱或相当的色谱柱(4.6mm*250mm,5.0um)
  • 流动相:甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液=26-2-72
  • 流速:1.0mL/min
  • 柱温:室温
  • 进样量:10uL

2、山萘素

对照品溶液制备:

取山萘素对照品适量,精密称定,加甲醇溶解稀释并定容至刻度,制成每1mL含9ug的溶液,即得。

供试品溶液制备:

取本品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入25%甲醇25mL,称定重量,加热回流30min,或65℃水浴中超声提取45min,放冷,在称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,过滤,精密量取续滤液15mL,置平底烧瓶中,加盐酸溶液(15-37)5mL,摇匀,置水浴中加热水解30min,立即冷却,转移至25mL量筒中用甲醇稀释至刻度,摇匀,用0.45um滤膜过滤,即得。

色谱条件:

  • 检测器:紫外检测器:检测波长:367nm
  • 流动相:甲醇-0.4%磷酸水溶液=48-52
  • 色谱柱:C18柱(4.6mm*250mm,5.0um)
  • 流速:1.0mL/min
  • 柱温:室温
  • 进样量:10uL

所需仪器配置:

仪器编号仪器名称所需数量
1高压输液泵1台
2紫外检测器1台
3手动进样阀1套
4阀安装支架1套
5液相色谱柱1支
6微量进样器1支
7维护工具包1套
8色谱工作站1套
9超声清洗仪1套
10真空抽滤装置1套
11分析天平1台
12水浴加热装置1套

8月27日 14:34

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