实蝇的分子鉴定研究 需要哪些实验仪器及试剂？农业害虫防治

随着分子生物学技术和生化技术的不断发展和完善，许多新的技术被应用在昆虫分类上，如RAPD、RFLP、DNA杂交。在国内，少数学者利用生化方法对实蝇进行鉴定，利用分子生物学方法对实蝇进行鉴定的几乎没有。本文利用RAPD和PCR技术对陕西常见4种实蝇进行研究，主要阐述实验中所需要的实验仪器设备以及试剂耗材等。

南瓜实蝇、具条实蝇、桔大实蝇、三点棍腹实蝇成虫均采用Cuelure诱剂和蛋白质诱剂采自陕西省岚皋县柑桔园，把标本采集回来以后，利用形态特征进行分类后，其中一部分针插后常规保存，一部分放入-70℃超低温冰箱中保存。

实验仪器设备

• PCT-200TM型(双槽)基因扩增仪
• UVIDBT-08型凝胶成像系统
• DYY12型三恒电泳仪
• MIKR.22R型台式高速冷冻离心机
• DYY-1131A型水平电泳槽
• VDUPF-20超纯水仪
• 核酸/蛋白质检测分析仪
• P2-P10-P20-P100-P200-P1000微量移液器
• MDF-382E超低温冰箱
• BP211D电子天平
• sw-cj-lf(单人双面)超净工作台
• TGL-1613台式高速离心机
• 85-1恒温磁力搅拌器
• HH-4数显恒温水浴锅
• PHS-2S精密酸度计
• KQ-C玻璃仪器烘干器

实验耗材试剂

1.5m1离心管、0.5m1和0.2m1PCR管、枪头、PE手套。

CTAB，DNA分子量标准；Na2EDTA，p一琉基乙醇、Tris、琼脂糖、随机引物；TagDNA聚合酶；异丙醇、氯仿、异戊醇；特异引物等。

在研究中，笔者发现在实验室超低温冰箱中保存的标本，无论是用CTAB法，还是Collins法，都能进行很好的提取，特别是在冰箱中保存达一年左右后，仍能较好地进行DNA的提取。由此可见，是否能提出干标本中的DNA，与提取方法、研磨程度、沉淀时间等没有直接的关系，而与标本的保存条件有很大关系。

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