分光光度计法测定衣藻中的叶绿素 与哪些因素有关

衣藻中的叶绿素是指叶绿素a和b。它们是衣藻进行光合作用的关键成分。测量叶绿素含量可以反映衣藻的光合效率。叶绿素含量的变化可用于研究环境条件对衣藻光合作用的影响。

叶绿素含量直接影响光合作用产能和新陈代谢，当叶绿素含量增加时，衣藻的生长速度会提高。可见，叶绿素含量的变化会直接影响衣藻的光合效率、代谢强度、繁殖及生长速度等。叶绿素含量越高，通常意味着衣藻状态越好，生长情况越理想。

测定衣藻中叶绿素的主要步骤：

提取叶绿素

通过超声扩散或冲洗的方法将衣藻中的叶绿素提取出来。常见的提取剂有乙醇、丙酮等。胡萝卜素等荧光物质需要通过硅油滤除。

稀释

将提取液准确稀释到适当体积，如添加80%乙醇调整至50ml。

分光光度测量

使用分光光度计分别测量样本在645nm和665nm处的 Abs值。

645nm和665nm分别对应叶绿素a和叶绿素b的吸收峰值。

计算叶绿素含量

根据以下公式计算叶绿素a和叶绿素b的浓度及总含量：

• 叶绿素a (mg/L) = 12.25 × A645。
• 叶绿素b(mg/L) = 20.2 × A665。
• 叶绿素总含量(mg/L) = 叶绿素a含量 + 叶绿素b含量。

其中12.25和20.2分别为叶绿素a和b在相应波长下的光密度系数。

根据绝对湿量计算单位重量叶绿素含量

将提取液体积(ml)除以绝对湿量(g)，可获得单位重量(1g)衣藻中叶绿素浓度。

重复实验提高准确性

重复采集样本并进行以上步骤，取平均值作为最终结果。

主要注意事项：

• 确保正确的吸收峰值。
• 提取剂不影响测量。
• 正确计算光密度系数。
• 重复实验减少偏差。

通过提取衣藻中的叶绿素，采用分光光度计在不同波长下检测吸收值，结合光密度系数计算叶绿素的浓度和单位重量下的含量。重复实验可减少偏差，最终结果更加准确。

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