磷 脂的测定-紫外分光光度计应用 有效降低干扰

磷脂是构成生物膜重要组分，磷脂除构成细胞膜结构外，参与信号转导。磷脂和磷化磷脂可以激活或抑制膜内受体和酶的活性，从而调控细胞信号转导网络。影响膜蛋白的功能。磷脂可以通过影响膜蛋白的折叠和结合性，调控它们的活性和功能。参与受体的内吞作用和分泌。酰基磷脂通过脂质翻转和磷酸化/去磷酸化循环，参与调控膜受体的集中和转运。调控膜微区的形成结构等方式发挥作用。

因此，测定环境中的磷脂含量能指示评价该环境对生物脂质产生的破坏和影响。表征磷脂微域的形成情况，间接反映细胞信号转导和功效的改变。紫外分光光度法是一种分析水样中磷脂的方法。

这种方法主要是基于磷脂中的不饱和脂肪酸残基具有吸收紫外线的能力。通过测量水样在不同波长下的吸收光密度，计算出磷脂浓度。

测定水样品中磷脂的主要方法是采用紫外分光光度计。主要步骤如下：

分离：将水样品经过萃取或过滤等处理，分离出磷脂。

氧化：采用过氧化氢或其他氧化剂氧化磷脂为磷酸根。

配制：将氧化后的样品溶液加入适量抗阴离子剂，形成复配液。

测定：采用紫外分光光度计测定复配液在805nm处的吸收值。

统计：根据提前制作的磷脂标定曲线，计算复配液的吸光度与磷脂浓度的关系，从而计算样品中磷脂的含量。

优点:

• 灵敏度高，能检测微量范围的磷脂；
• 抗阴离子剂能有效降低干扰；
• 操作简单，直接测量吸光度即可推算含量。

主要原理：磷脂中的磷被氧化为磷酸根，磷酸根在酸性和抗阴离子剂存在下会与阴离子剂作用生成配合物，在805nm处具有吸收峰。通过测量复配液在此波长的吸光度，间接计算样品中磷脂的含量。

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