火焰原子吸收分光光度计 测定细胞钙含量 操作方便 结果精确

细胞质钙含量指细胞质中的钙浓度。细胞受刺激时钙由细胞浆释放进入细胞质，影响细胞功能。细胞钙含量的变化可以影响，细胞的代谢活性和生长，细胞器的结构和功能，细胞周期的调控，程序细胞死亡，细胞的分化和致敏感化。所以测量细胞钙含量对研究细胞功能很重要。常见方法是火焰原子吸收分光光度法。

通过绘制钙离子标准曲线，根据细胞溶液的吸收信号强度计算其钙浓度，进而确定细胞钙含量。

主要步骤：

提取细胞：利用超速离心机离心细胞悬浮液，收集上清液。

添加溶解液：使用盐酸水溶液溶解细胞中物质，使细胞内钙离子释放出来。

制备钙标准液：制备不同浓度的钙离子标准液，绘制标准曲线。

火焰原子吸收分析：将钙标准液和上清液导入分光光度计，通过火焰将钙离子还原为自由态原子。

测量吸收信号：在相应的波长处(一般约为422nm)测量钙离子的吸收信号强度。

根据标准曲线计算：根据钙标准液的标准曲线计算溶液中的钙离子浓度。

计算细胞钙含量：根据细胞质液体积计算细胞中钙的绝对含量。

主要原理为：

• 火焰原子吸收分光光度法具有高选择性和敏感度，能准确测定钙离子的浓度。
• 不同钙离子浓度对应不同的吸收信号强度，并且 Beer-Lambert之法适用于此。
• 通过绘制钙离子标准液的标准曲线，可根据溶液中钙离子的吸收信号强度计算其浓度，再根据细胞质浓度计算细胞的钙含量。

整体来说，火焰原子吸收法在测定细胞钙含量时简单高效、操作方便、结果精确，适用于大范围的钙含量测定。

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