黄曲霉毒素是具有极强致癌性的次生代谢产物，主要存在于粮油制品中。主要有B1，B2，G1，G2 以及另外两种代谢产物M1，M2。B1为毒性及致癌性最强的物质。在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。它们存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。
主要检测方法：
食品中黄曲霉毒素的检测方法主要有薄层色谱法、酶联免疫法、液相色谱法等。薄层色谱法操作繁琐，而酶联免疫法特异性差。本研究对粮食、坚果样品经乙腈一水进行净化提取，色谱柱纯化、浓缩、衍生，对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，进行高效液相色谱 （high performance liquid chromalography，HPLC）检测。
主要仪器及试剂：
试剂：黄曲霉素标准品：乙腈，HPLC专用：甲醇，HPLC专用；三氟乙酸：10mol／l．乙酸铵溶液：0.77g乙酸铵溶解于1000mL水中定容。
液相色谱仪器条件：
色谱柱：C 4.6mmx150 mm，5 μm）；柱温：40 ℃：检测器：G1321A荧光检测器；波长450nm：流动相：乙腈：甲醇：水1：3：6：流速0.8mL／min：进样量：20 μL。
试验步骤：
标准品准备：
分别取1mL黄曲霉毒素混合标准质量浓度分别为1.25、2.5、5、10 μg／L，氮气吹干，在加入0.1ml三氟乙酸溶液，密封激烈振荡。室温黑暗处放置15min，再准确加入0.9mL乙腈和水：V＝9：1），离心，取上清液进行测定。
样品前处理：
粮食取5.0g经粉碎的样品于50mL的具塞离心试管中，加入10ml乙腈和水，V乙腈）：V（水）＝9：1，振荡30min，离心。取约5mL上清液，注入净化柱净化。弃去前1mL，准确分取0.5mL溶液，氮气吹干，除去溶剂。再加入0.1mL三氟乙酸，蜜封激烈振荡，室温黑暗处放置15min。再准确加入0.9mL乙腈和水：V＝9：1），离心，取上清液进样。
坚果取5.0g经粉碎的样品于50mL的具塞离心试管中，加入40mL乙腈和水，V乙腈）：V水）＝9：1，振荡30min，离心。取约5mL上清液，注入净化柱净化。弃去前1mL，准确分取0.5mL溶液，氮气吹干，除去溶剂。再加入0.1mL三氟乙酸，密封激烈振荡，室温黑暗处放置15min。再准确加入0.4mL乙腈和水V：V＝9：1），离心，取上清液进样。
小结：
本实验建立的高效液相色谱法测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2方法，样品前处理简单，净化效果好，灵敏度高，特异性强，线性范围广。样品添加回收，回收率在为78.5％。
更多> 检测实验 试验
0 评论
