紫外分光光度计测定 大浓度溶液的浓度容易出现哪些问题

当需要测量的样品浓度超出光度计测量线性范围时，称为大浓度溶液。一般情况下，光度计最多只能测量到OD(光密度)值2.0左右。如果溶液的OD值超过2.0，就已经进入大浓度范围了。

用紫外分光光度计测定大浓度溶液时还是要适当稀释，降低浓度进入光度计的线性范围。同时建立好标准曲线，才能准确测量出溶液的浓度。

紫外分光光度计原理是测量样品对特定光的吸收率，从而计算其浓度。但是大浓度溶液会出现几个问题：

• 像游离吸收过强，移除基底效应不充分。
• 样品的颜色太深，光的传输受限。
• 存在多组分，可能会并吸收。

所以测定大浓度溶液有以下一些措施：

稀释：最直接方法是对样品进行稀释，使之在合适范围内。可以事先画好校准曲线，确定适宜的稀释倍数。

增强吸收谱线：可通过增加浓度更高的参比标准来增强谱线。

选择不同的波长：避免同时吸收，选择该组分单独吸收的波长进行测量。

减少基底效应：可以变换型号的测量室增加吸收，减少基底效应。

对照卷积标准曲线法：以高纯标准品作对照，通过多种浓度点作标准曲线。

经验公式：对同样品种的浓溶液，经验性建立与浓度的对应关系。

以上这些方法，稀释测量仍然是最实用的。其他方法在不变测定条件的条件下增加测量准确性。

在测量大浓度溶液时，紫外分光光度计相比单波长光度计具有更大的测量范围、更灵活的测量参数和更准确的标准曲线，能提供更高的精密度。从而获得更精确的浓度结果。

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