紫外分光光度计测空白 保证数据可靠性
使用紫外分光光度计时,测量样品前先测空白,它可以起到消除背景吸收,校正仪器误差,获得标准曲线,提高测量准确性,为后续的样品测量打下坚实基础。
测量样品前需要先测空白是很重要的一步,尤其是使用紫外分光光度计时,定期测量空白是保证紫外分光光度计数据可信性的必要途径。定期进行空白测量才能更好掌握变化,保证数据可靠。
主要原因有:
- 校正仪器本身的误差:每个仪器的性能都略有差异,测空白可以校正仪器读取具体样品时产生的误差。
- 消除背景吸收:紫外分光光度计本身或试剂会产生一定的吸收,影响最终读数。测空白可以排除这些背景吸收。
- 标准化浓度曲线:只有相对于空白进行标准曲线拟合,最终浓度计算才会准确。
- 筛选干扰频率:测空白可以找出可能存在的干扰波长,有助于避免。
具体操作方式:
- 加载空的量线瓶或试管。注意保证使用同样的入样装置。
- 设置相同的测量条件,如波长、扫描速度等。
- 进行连续扫描,直到曲线趋于水平和平坦。
- 保存此空白曲线,作为样品测量和计算的参考。
- 每隔一段时间重新测量空白,以保证准确。
一般建议测量空白的频率至少是:
- 每次换一个新批试剂时
- 每个月测量一次
- 在仪器的功能或环境有重大变化时
综上,测量空白对紫外分光光度计读数的准确性有重要意义。实验操作时不可忽略。
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